近日,首都醫科大學附屬北京佑安醫院丙肝與中毒性肝病科研究人員發表論文,旨在探討丙型肝炎病毒(hepatitisCVirus,HCV)1b基因型(genotype1b,GT-1b)C區氨基酸(aminoacid,aa)70替代對干擾素刺激應答元件(interferon-stimulatedresponseelement,ISRE)的影響。研究指出,單純R70Q/H變異的核心蛋白似乎並不足以直接導致IFNα耐藥。該文發表在2014年第07期《醫學研究雜志》上。
首先構建HCVGT-1bC區aa70野生型和變異型核心蛋白表達質粒,測序鑒定後瞬時轉染肝瘤細胞系Huh7細胞,Westernblot法鑒定HCV核心蛋白的成功表達;然後利用ISRE雙熒光素酶報告基因實驗檢測核心蛋白表達對ISRE活化的影響,並以SYBRGreenreal-timePCR檢測3種主要干擾素刺激基因(interferonstimulatedgenes,ISGs)的表達情況。
構建了HCVaa70野生型和變異型核心蛋白表達質粒,並在體外培養細胞中成功表達。但野生型和變異型核心蛋白表達對ISRE活化及3種主要ISGs表達的影響無明顯差異。